實(shí)驗(yàn)室工作中，經(jīng)常會(huì)需要用到純化的DNA，這時(shí)我們通常需要使用一個(gè)DNA提取試劑盒對(duì)目的DNA進(jìn)行分離純化。市面上有很多類(lèi)型的提取試劑盒，當(dāng)使用不太熟悉的樣本類(lèi)型時(shí)，選擇合適的盒子是尤為關(guān)鍵的。

 

　　DNA提取試劑盒組分：

　　目前大多數(shù)DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟：裂解，柱純化，洗滌雜質(zhì)，柱洗脫。然而，不同的盒子在完成每個(gè)步驟的方式上有很大的不同。

 

　　使用的樣本類(lèi)型：

　　不同的DNA來(lái)源有不同的試劑盒，從實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的細(xì)胞，到臨床樣本，土壤樣本，甚至指紋，也有許多專(zhuān)門(mén)用于某些應(yīng)用的試劑盒。例如，土壤中的腐殖酸或血液中的血紅蛋白會(huì)污染純化的DNA，從而干擾下游的DNA實(shí)驗(yàn)。當(dāng)然，也有一些試劑盒會(huì)在進(jìn)行純化步驟之前專(zhuān)門(mén)去除這些組分。如果想從PCR或瓊脂糖凝膠中純化DNA，有許多方法可以提高瓊脂糖凝膠純化的回收率。

 

　　在選擇DNA提取試劑盒時(shí)，重要的變量可能是你所使用的生物體。

　　1、細(xì)菌：許多試劑盒都有用于細(xì)菌DNA分離的不同成分，這些試劑盒之間的主要區(qū)別在于細(xì)胞是如何被分解的，因?yàn)橛行┘?xì)菌比其他細(xì)菌更更有挑戰(zhàn)性。例如，形成生物膜的細(xì)菌可能比傳統(tǒng)的基于去垢劑的方法需要更強(qiáng)的裂解技術(shù)。

　　2、動(dòng)物組織：用于動(dòng)物組織DNA分離的試劑盒通常具有更溫和的裂解技術(shù)，因?yàn)榇蠖鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞不像細(xì)菌細(xì)胞那樣有細(xì)胞壁。然而，動(dòng)物組織DNA提取的挑戰(zhàn)往往在于選擇合適的組織勻漿方法。此外，許多動(dòng)物DNA純化試劑盒不使用苯酚/氯仿萃取或乙醇作為沉淀步驟，以減少破壞DNA的風(fēng)險(xiǎn)。

　　3、植物：當(dāng)涉及到植物DNA分離時(shí)，必須考慮到其他一些因素，需要注意污染物的去除。植物在純化過(guò)程中通常含有未分離的糖，因此，洗滌劑選擇性地與DNA結(jié)合并從溶液中析出，通常是先將洗滌劑溶解在高濃度的鹽溶液中，然后提取DNA。

　　4、血液：由于技術(shù)上的許多最新進(jìn)展，血液DNA分離試劑盒中有多種裂解技術(shù)和提取方法可供選擇。從血液中分離出的DNA將在很大程度上決定你使用的裂解和提取的類(lèi)型。無(wú)論應(yīng)用是什么，一定要選擇一種能夠提供純凈、完整、雙鏈和濃縮DNA的試劑盒，以獲得最佳效果。